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雞禽流感抗體檢測試劑盒的操作方法及注意事項
更新時間:2019-08-26 點擊量:2726
       雞禽流感抗體檢測試劑盒用于評估養雞場雞禽流感疫苗免疫狀況及感染雞的血清學輔助診斷。本試劑盒采用間接ELISA法,在酶標板微孔上預包被禽流感抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經過溫育后,若樣品中含有禽流感特異性抗體,則與包被板上的抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后;加入酶標二抗,與檢測板上的抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶結合物;在微孔中加入TMB底物液,經酶催化形成藍色產物,加入終止液終止反應后,用酶標儀450nm波長測定反應孔中的吸光度A值。
  雞禽流感抗體檢測試劑盒的操作步驟:
  1.取預包被的檢測板(根據樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性及陽性對照各100μl分別加入反應孔中,空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。
  2.蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  3.小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔(約350μl),靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。
  4.每孔加酶結合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  5.小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌3次,方法同2。切記在干凈吸水紙上拍干。
  6.每孔先加底物A液50µl、再加底物B液50µl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。
  7.每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。
  雞禽流感抗體檢測試劑盒的注意事項:
  1.試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫,使用前應搖勻,使用后放回2~8℃。
  2.不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應防止試劑污染。
  3.底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。
  4.TMB(底物B液)不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。
  5.檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2~8℃)。
  6.所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。
  7.嚴格遵守操作說明可以獲得的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須。
  8.血清稀釋板為一次性用品,不得重復使用;血清稀釋板的較大容量為300μl/孔。

滬公網安備 31011802001677號

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