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氯霉素檢測應如何正確操作?
更新時間:2019-07-29 點擊量:2647
     一、氯霉素檢測具體實行步驟:
  樣品制備
  a)將3克已均質的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震蕩5分鐘。
  b)用離心機離心1700×g10分鐘,取2mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,于50℃下,利用氮氣將有機溶劑吹干。
  c)在此玻璃管中加入正己烷1mL,先將殘余物*溶解后,再加入1mL樣品稀釋液,震蕩30秒鐘。
  d)用離心機離心1700×g 10分鐘,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
  稀釋倍數:1
  若待測物為白蝦可按以下流程將樣品做8倍濃縮以增加檢品敏感度
  a)將6克已均質的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震蕩5分鐘。
  b)用離心機離心1700×g 10分鐘,取4mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,于50℃下,利用氮氣將有機溶劑吹干。
  c)在此玻璃管中加入正己烷2mL,先將殘余物*溶解后,再加入0.5mL樣品稀釋液,震蕩30秒鐘。
  d)用離心機離心1700×g 10分鐘,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
  稀釋倍數:0.125
  二、氯霉素檢測的操作步驟:
  1、于適當微孔中分別加入100mL標準溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
  2、在另外的微孔中加入100mL已完成前處理的樣品溶液。
  3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標記物。
  4、輕敲盤子四周,使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時。
  5、將微孔中的反應液甩掉,再將洗液加滿每一微孔后甩掉,重復洗3次。
  6、較后一次甩掉后,在吸水紙上拍干。
  7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后,輕敲盤子四周,使其充分混合。
  8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
  9、于每一微孔中加入100mL反應終止液。
  10、用酶標儀于波長450nm下判讀。

滬公網安備 31011802001677號

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